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重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)與原核表達(dá)系統(tǒng)的區(qū)別

  • 發(fā)布日期:2021-10-14      瀏覽次數(shù):2670
    •   重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)與原核表達(dá)系統(tǒng)的區(qū)別
        重組蛋白真核表達(dá)采用原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行研究,主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中,通過(guò)IPTG誘導(dǎo)和終純化獲得所需的目的蛋白。其優(yōu)點(diǎn)是可以在短時(shí)間內(nèi)獲得基因表達(dá)產(chǎn)物,所需成本相對(duì)較低。
        目前的表達(dá)系統(tǒng)各有利弊,但一般理想的表達(dá)系統(tǒng)滿足以下幾點(diǎn):一是特異性,不受其他內(nèi)源性因素影響,只能通過(guò)外源性無(wú)毒物激活。二是不干擾,不干擾細(xì)胞通路。以及誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。
        因此,在選擇表達(dá)系統(tǒng)時(shí),必須充分考慮各種因素,如蛋白質(zhì)性質(zhì)、實(shí)驗(yàn)條件、生產(chǎn)成本、表達(dá)水平和安全性。權(quán)衡利弊后,選擇相應(yīng)的表達(dá)系統(tǒng)。
        原核表達(dá)系統(tǒng)與重組蛋白真核表達(dá)系統(tǒng)的區(qū)別:
        1.根本的區(qū)別是,原核表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)系統(tǒng)是原核細(xì)胞;真核表達(dá)系統(tǒng)在真核細(xì)胞如酵母細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)。
        2.兩種表達(dá)系統(tǒng)都通過(guò)含有原核或真核啟動(dòng)子和其他表達(dá)相關(guān)元件的質(zhì)粒系統(tǒng)表達(dá)外源基因。
        3.與真核表達(dá)系統(tǒng)相比,原核表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)效率易于優(yōu)化和調(diào)整,表達(dá)量高。然而,當(dāng)用于表達(dá)真核外源基因時(shí),由于不同的蛋白質(zhì)折疊和糖鏈修飾,其應(yīng)用受到限制。真核表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)量相對(duì)較低。雖然酵母和昆蟲系統(tǒng)的表達(dá)量相對(duì)較高,但哺乳動(dòng)物基因的表達(dá)也存在不足。

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